Calibrando o microscópio
14 de outubro de 2023Este artigo é a continuação do artigo de calculo de microscopia.
É um estudo de caso, e ainda não foi validado.
Para isso usaremos a medida da lamina de 0,01mm ou 100 micrometros.
Ao jogarmos em nosso microscópio, temos a seguinte imagem com apliação de 10x, conforme haviamos apresentado em nosso artigo anterior.
Essas medidas foram capturadas através do software Yais,, ficando conforme apontado abaixo:
Medidas horizontais:
- 0,01 mm => 352 pixels
- 0,001 mm =: 34pixels
Medidas verticais
- 0,01 mm => 352 pixels
- 0,001 mm => 37 pixels
Agora vem os calculos
Calculando FOV ou Campo de Visão do microscópio.
Para calcular o campo de visão o meu microscópio precisa ter duas coisas:
Ampliação e numero de campo.
O meu microscópio não tem o campo de visão, por este motivo, não consegui determinar com precisao ele, porem posso achar a relação de visão por pixel.
Para achar isso precisarei pegar esse través de visualização.
Como não foi informado, usarei a medida horizontal. Para calcular tenho o tamanho total em pixel.
Total = 1597px
Sabendo que 0,01 mm tem 352pixel , fazemos a regra de três e achamos a area total de visão.
Agora aplicando as contas 352X = 1597* 0,01 => X = 15.97/352 => X = 0,0453mm
Desta forma temos a medida total (largura) de 0,0453mm
Agora vem o FOV
Determinar a resolução da câmera
A resolução diz a densidade da largura por pixel
Onde a largura é 0,0453mm
O Pixel é 1600×1200, desta forma a densidade horizontal é:
D = 0,0453 / 1600 => D = 0,0000283125mm /pixel
Desta forma calculo de distancias, basta aplicar o nro de pixel, multiplicado por esse valor.
Desta forma se houver 352 pixel a distancia é aproximadamente 0,009966 ou 0,01 mm aproximadamente.
Como a resolução horizontal é diferente da vertical temos densidades diferentes.
O densidade vertical = 0,0453/1200 ; onde temos
Desta forma é possivel medir objetos.
Conclusão
Agora ficou simples medir distancias no microscópio, basta contar os pixels e calcular as distancias relativas.
Próximo artigo
No próximo artigo, mostrarei a implementação destes calculos em python.
Com uso da lib opencv e a respectiva medida de valores de tamanho.
Referências
Outra referencia que me ajudou a montar esse trabalho:
https://www.olympus-lifescience.com/pt/microscope-resource/primer/anatomy/oculars/
https://port.lamscience.com/how-calculate-field-view-microscope