Calibrando o microscópio

Este artigo é a continuação do artigo de calculo de microscopia.

É um estudo de caso, e ainda não foi validado.

Calculo de área de microscopia
Através de uma lamina de calibração ou tambem chamada Régua deslizante de calibração, podemos medir os valores obtidos em pixels.

Para isso usaremos a medida da lamina de 0,01mm ou 100 micrometros.

Ao jogarmos em nosso microscópio, temos a seguinte imagem com apliação de 10x, conforme haviamos apresentado em nosso artigo anterior.

Essas medidas foram capturadas através do software Yais,, ficando conforme apontado abaixo:

Medidas horizontais:

  • 0,01 mm => 352 pixels
  • 0,001 mm =: 34pixels

Medidas verticais

  • 0,01 mm => 352 pixels
  • 0,001 mm => 37 pixels

Agora vem os calculos

Calculando FOV ou Campo de Visão do microscópio.

Para calcular o campo de visão o meu microscópio precisa ter duas coisas:

Ampliação e numero de campo.

O meu microscópio não tem o campo de visão, por este motivo, não consegui determinar com precisao ele, porem posso achar a relação de visão por pixel.

Para achar isso precisarei pegar esse través de visualização.

Como não foi informado, usarei a medida horizontal. Para calcular tenho o tamanho total em pixel.

Total = 1597px

Sabendo que 0,01 mm tem 352pixel , fazemos a regra de três e achamos a area total de visão.

\[ {tamanho01 \over dimensao01} = {tamanho02 \over dimensao02} \]
\[ {X \over 1597} = {0,01 \over 352 } \]

Agora aplicando as contas 352X = 1597* 0,01 => X = 15.97/352 => X = 0,0453mm

Desta forma temos a medida total (largura) de 0,0453mm

Agora vem o FOV

\[ FOV = { largura \over ampliação} \]
\[ FOV = { 0,0453\over 10} \]
\[ FOV = { 0,00453} \]

Determinar a resolução da câmera

A resolução diz a densidade da largura por pixel

\[ densidade{pixel} = {largura \over pixel} \]

Onde a largura é 0,0453mm

O Pixel é 1600×1200, desta forma a densidade horizontal é:

D = 0,0453 / 1600 => D = 0,0000283125mm /pixel

\[ densidade{horizontal} = { 0,0000283125mm /pixel} \]

Desta forma calculo de distancias, basta aplicar o nro de pixel, multiplicado por esse valor.

\[ Distancia{horizontal} = {pixel * d} \]

Desta forma se houver 352 pixel a distancia é aproximadamente 0,009966 ou 0,01 mm aproximadamente.

Como a resolução horizontal é diferente da vertical temos densidades diferentes.

O densidade vertical = 0,0453/1200 ; onde temos

\[ densidade{Vertical} = { 0,00003775mm /pixel} \]

Desta forma é possivel medir objetos.

Conclusão

Agora ficou simples medir distancias no microscópio, basta contar os pixels e calcular as distancias relativas.

Próximo artigo

No próximo artigo, mostrarei a implementação destes calculos em python.

Com uso da lib opencv e a respectiva medida de valores de tamanho.

Referências

Outra referencia que me ajudou a montar esse trabalho:

https://www.olympus-lifescience.com/pt/microscope-resource/primer/anatomy/oculars/

https://port.lamscience.com/how-calculate-field-view-microscope